de EGFR-TKI ‘ s hebben een specifiekere klinische werkzaamheid, vergeleken met standaard chemotherapie19, wanneer gegeven als tweedelijnstherapie of derdelijnstherapie voor gevorderd NSCLC. Er is echter aangetoond dat 60% van de patiënten die gedurende 6 tot 10 maanden een TKI-behandeling kregen uiteindelijk resistentie tegen TKI ‘ s zou ontwikkelen. Geneesmiddelresistentie werd ingedeeld in primaire en secundaire resistentie (verworven resistentie). Meestal patiënten die TKI ‘ s ontvangen voor ongeveer 2 weken zou een verbetering van de klinische symptomen, zoals tumor massa verminderd in radiografie en, effectevaluatie, met inbegrip van complete remissie (CR), partiële remissie (PR), of stabiele ziekte (SD) op een bepaald tijdstip. Als tumoren geen duidelijke respons vertonen op TKI ‘ s tijdens de eerste behandeling, wordt dit primaire resistentie genoemd. Secundaire weerstand (verworven weerstand) is heel verschillend in definitie; een schijnbaar gunstig behandelingseffect kan worden waargenomen na het starten met TKIs, maar na 6 tot 10 maanden behandeling kan de tumor niet langer worden onderdrukt en kan zelfs in omvang toenemen, wat resulteert in geen verbetering van de behandeling. Momenteel zijn veel resistentiemechanismen tegen TKI ‘ s geïdentificeerd, maar mechanismen van primaire resistentie zijn niet duidelijk. Het best beschreven mechanisme van primaire resistentie is een mutatie in het KRAS-oncogeen die aanwezig is bij 20 tot 30% van de longkankerpatiënten. Het belangrijkste mechanisme van verworven resistentie werd gerapporteerd als de T790M-mutatie op exon 20 op de EGFR gene20, 21. Andere mechanismen zijn versterking van de MET gene20, 21, PIK3CA-mutatie21, 22, BRAF-mutatie23,epitheliaal-naar-mesenchymale transitie (EMT)21 en kleincellige longkanker (SCLC) transformatie20, 21.

door twee groepen is gemeld dat een secundaire threonine-methioninemutatie bij codon 790 (T790M) van het EGFR-gen gerelateerd is aan verworven resistentie tegen gefitinib en erlotinib (eerste generatie TKIs)24,25. De modellering van de kristalstructuur heeft aangetoond dat residu T790 in de ATP-bindende zak van het katalytische gebied van EGFR wordt gevestigd, en het schijnt kritiek voor de band van erlotinib en gefitinib24 te zijn. De vervanging van threonine bij codon 790 met een omvangrijk residu, zoals methionine, zou in steric belemmering aan de band van deze twee drugs resulteren. Een secundaire T790M-mutatie is geà dentificeerd in één tumor24 en in drie van zes tumors25 met verworven resistentie tegen gefitinib. In onze studie vonden we het primaire mutatiepercentage van T790M 1,6% (3/177) en het secundaire mutatiepercentage was 42.8% (15/35). Deze verandering ondersteunt verder dat de T790M-mutatie een belangrijke speler kan zijn tijdens de ontwikkeling van verworven resistentie.

detectiemethoden voor T790M-mutaties omvatten direct sequencing (DS), amplification refractary mutation system (ARMS), real time quantitative PCR (qPCR), droplet digital PCR (ddPCR) en next generation sequencing (NGS). Voor de detectie van T790M hebben deze detectiemethoden hun eigen voor-en nadelen: 1. Vergeleken met ddPCR en NGS is het detectieproces van armen en Superarmen relatief eenvoudig en snel, en de kosten zijn lager, maar de gevoeligheid is iets lager. 2. Vergeleken met wapens en superwapens is de gevoeligheid van de ddPCR en NGS iets hoger, maar het detectieproces is complex en de kosten zijn hoger. Het directe rangschikken is een standaardmethode voor de opsporing van T790M-veranderingen in China, maar het proces is vervelend, tijdrovend en de gevoeligheid is lager26. De meeste mutaties zijn somatische mutaties, mutantcellen die gewoonlijk gemengd worden met wild type cellen. ; aldus, heeft het geëxtraheerde DNA vaak een grote hoeveelheid wild typedna, zodat heeft de opsporing van verandering op somatische cellen hogere specificiteit nodig. Op dit moment, is het directe rangschikken beperkt en kan niet aan klinische behoeften voldoen. De Super ARMS, die we gebruikten in dit onderzoek, is een bijgewerkte technologie gebaseerd op traditionele wapens. We voegden een zelf-geringde structuur op de super ARMS primer die kan worden geopend en Begrensd met een doelsequentie tijdens de gloeiende stap, om de detectie van een bepaalde mutatie te bereiken. Deze structuur versterkte de onderscheidende capaciteit van de inleiding en verbeterde zo de specificiteit en gevoeligheid van de analyse. In onze studie waren de gevoeligheid, specificiteit, PPV, NPV en nauwkeurigheid van de Superarmen 100.0%, 99.4%, 94.7%, 100.0% en 99,5%, respectievelijk. De gevoeligheid was hoger dan de traditionele ARMS (48,2–63,6)26,27, en andere parameters waren in principe in overeenstemming met eerdere studies26,27. Er zijn twee voordelen van Super armen in vergelijking met armen. Ten eerste is de detectiegevoeligheid van Superarmen sterk verbeterd (0.2% versus gevoeligheid van de armen van 1%), waardoor meer patiënten met EGFR-mutaties kunnen worden gedetecteerd. Ten tweede, vergeleken met armen, Super armen is vooral geschikt voor plasmamonsters vanwege zijn hogere gevoeligheid. Digitale PCR (dPCR) is een hoogst gevoelige methode van de opsporing van de genmutatie die op de compartmentalisatie en versterking van enige molecules van DNA wordt gebaseerd. De kwantificering van compartimenten met eindpuntfluorescentie na het PCR-proces onthult het aantal exemplaren van doeldna. Druppel digitale PCR (ddPCR) is één dergelijke dpcr-technologie die op de compartmentalisatie van DNA in druppels wordt gebaseerd. In ddPCR, worden de individuele fragmenten van DNA in meer dan een miljoen druppels gecompartimenteerd, die dan parallel worden vergroot. ddPCR is een veelbelovende technologie aangezien zijn snelheid, kosten, en het gebruiksgemak gelijkaardig aan andere op PCR-gebaseerde analyses zijn, nog biedt de gevoeligheid en de kwantitatieve aard van deze analyse bredere klinische toepassingen aan. Momenteel is bewezen dat ddPCR een efficiënte en betrouwbare methode is voor de detectie van de T790M-mutatie28,29. Daarom werden alle monsters van Super ARMS opnieuw gecontroleerd door ddPCR in onze studie. In het bijzonder, één steekproef werd beoordeeld als vals positief wanneer, vergeleken met ddpcr resultaat. Twee redenen kunnen dit probleem verklaren. Ten eerste was de detectie van het resultaat dicht bij de kritische waarde, en vervolgens werd het verkeerd beoordeeld als positief. Bovendien, kan PCR verontreiniging ook tot vals positief leiden. Ondanks één vals positief geval, kan de techniek verder worden verbeterd en geïntensiveerd.

het EGFR-mutatiepercentage was 30.1% (64/212) onder de patiënten met NSCLC, wat in het bereik van eerdere onderzoeken (30-50%)3,30,31,32 lag. Evenzo werden vrouwelijke, nooit-rokers, hersenmetastase en adenocarcinoom geassocieerd met een hoger percentage EGFR-mutaties in deze studie. Gedeeltelijk werden we net onderzocht de prevalentie van de EGFR-T790M mutaties in de provincie Yunnan in het zuidwesten van China.

het T790M-mutatiepercentage was 8,4% bij patiënten met NSCLC, wat in het bereik van eerdere rapporten33,34 lag. In de niet-TKI-plasmamonsters waren vrouwelijke, nooit-rokers en adenocarcinoom in deze studie niet significant gerelateerd aan een hogere T790M-mutatiepercentages bij NSCLC-patiënten. Dit was vergelijkbaar met andere eerdere studies34, 35. Hersenmetastase was gecorreleerd met een hoger T790M-mutatiepercentage bij NSCLC-patiënten. Dit was ook vergelijkbaar met andere verslagen 34,35. Het T790M-mutatiepercentage was echter 0,0% (0/31) in TNM-Stadium (Ia-IIIa). Specifiek was het lager dan het T790M-mutatiepercentage in het TNM-Stadium (IIIb-IV), dat 9,9% (18/181) was; er werd geen significant verband gevonden in het TNM-Stadium. Hoewel dit niet overeenkomt met andere eerdere studies, werd de tendens ervan uitgesproken36. Er zijn drie verklaringen die dit geschil beter kunnen verklaren. Ten eerste hebben we alleen beschikbare gegevens verzameld in dit onderzoek, wat kan leiden tot een selectievooroordeel. Ten tweede was het aantal monsters niet voldoende om de relatie tussen de T790M-mutaties en het TNM-stadium van NSCLC in de provincie Yunnan weer te geven. Tenslotte is biopsie nog steeds de gouden standaard voor het opsporen van T790M-mutaties. Nochtans, aangezien plasma werd gebruikt om de verandering van T790M in deze studie te ontdekken, kan het ook tot vertekening leiden. In de post-TKI-plasmamonsters waren vrouwelijke, nooit-rokers en adenocarcinoom niet significant geassocieerd met het hogere T790M-mutatiepercentage bij NSCLC-patiënten in deze studie. Dit was vergelijkbaar met andere eerdere studies34. Hersenmetastase werd gecorreleerd met een hoger percentage T790M mutaties, wat in goede overeenstemming was met andere rapporten35. Het T790M-mutatiepercentage was 42,8% (15/35) in TNM-Stadium (IIIb-IV). Daarom was, ongeacht de status van de TKI-behandeling, hersenmetastase gecorreleerd met een hoger aantal NSCLC-patiënten.

In de niet-TKI-plasmamonsters was de T790M-mutatiesnelheid 1.6% (3/177). Dit was lager dan in andere eerdere studies die wapens detective method35,37 gebruikt. Daarom waren zowel Super AMRS als armen beperkt voor de detectie van primaire T790M-mutatie. In de post-TKI-plasmamonsters was het T790M-mutatiepercentage 42,8%, wat consistent was met andere eerdere rapporten35,37 en veel hoger dan de niet-TKI-plasmamonsters (p < 0,001). Om verder te bewijzen dat het belangrijkste mechanisme van verworven resistentie secundaire T790M-mutatie is. We analyseerden ook de relatie tussen T790M-mutatiesnelheid en duur van TKI om het mechanisme van verworven resistentie te onderzoeken. We vonden dat de duur van TKI gedurende 6 tot 10 maanden (p < 0,01) en >10 maanden (p = 0,01) geassocieerd werden met een hoger T790M mutatiepercentage. Er werd ook bevestigd dat veel patiënten die ervoor kozen om TKI gedurende ten minste 6 maanden te gebruiken resistentie zouden ontwikkelen, en 60-70% van de TKI-resistentie was gerelateerd aan de T790M-mutatie38. Evenzo was het T790M-mutatiepercentage 66,6% (8/12) in duur van TKI (6-10 maanden). Dit was lager dan de duur van TKI (>10 maanden), 75% (9/12), wat consistent was met andere rapporten37, 38.uit onze vorige studies bleek dat het percentage EGFR-mutaties in Xuanwei-stad verschilde van dat van de Algemene populaties3, wat ons onderzoek motiveerde naar de vraag of de T790M-mutatie regionale specificiteit heeft in Xuanwu-stad. We vonden echter dat NSCLC-patiënten in Xuanwei City een lager T790M-mutatiepercentage hadden in vergelijking met niet-Xuanwei City in onze studie. Bovendien werd geen significant verband gevonden in Xuanwei oorsprong. Daarom kunnen andere factoren een belangrijke rol spelen in de progressie en ontwikkeling van longkanker, behalve genetische factoren in Xuanwu City. Aangezien onze studie patiënten rekruteerde in een enkel centrum en het aantal Xuanwei NSCLC patiënten monsters waren niet groot genoeg, wat leidt tot het feit dat onze steekproef niet beter kon weerspiegelen het percentage EGFR-T790M mutaties in Xuanwei stad. Maar, verdere studies worden verwacht.

patiënten met EGFR-mutant NSCLC hebben significant therapeutisch voordeel van TKI ‘ s. Helaas is verworven resistentie een onvermijdelijk gevolg van deze behandelingsstrategie. Daarom is het bijzonder belangrijk om een behandelingsstrategie te vinden die de resistentie van TKI ‘ s als gevolg van de T790M-mutatie zal overwinnen. De behandelingsstrategie voor geneesmiddelresistentie in dit stadium is als volgt: 1. Delay acquired resistance to TKIs: evaluatie van patiënten met progressie op eerstelijns tkis therapie is voornamelijk afhankelijk van RECIST( Response Evaluation Criteria in Solid Tumors), maar dit geeft geen richtlijnen voor het terugtrekken van het geneesmiddel. Sommige patiënten kunnen RECIST-progressie hebben op basis van tumormetingen, maar vertonen een blijvend klinisch voordeel van de therapie. Veel asymptomatische patiënten kunnen een verandering in de therapie 2-3 maanden uitstellen39. In twee studies werd gemeld dat sommige patiënten met NSCLC gevoelig waren voor EGFR-remmers en dat wanneer de TKI ‘ s werden onderbroken, dat de kankerprogressie zou leiden tot versnelde 40,41. Als gevolg hiervan is het nog steeds voordelig om TKI ‘ s voor veel patiënten te blijven gebruiken, zelfs nadat TKI-resistentie is ontstaan. Het moet echter duidelijk zijn wanneer de TKI ‘ s moeten worden gestopt: (1) Nieuwe metastatische laesies (hersenmetastase niet inbegrepen, vanwege de bloed-hersenbarrière), met name het ontstaan van een breed scala aan metastasen. (2) ziektegerelateerde symptomen namen aanzienlijk toe. (3) de tumor groeit snel. 2. Tweede generatie TKI ‘ s: Afatinib is een dubbele EGFR/HER2-remmer die nu FDA-goedgekeurd is voor de eerstelijnsbehandeling van longkanker met EGFR L858R-mutaties of exon 19-deleties. NCCN stelde ook voor gebruikend afatinib om eerste generatietkis te vervangen nadat zij drugresistance42 veroorzaken. 3. Derde generatie TKI ‘ s: In de 2016 editie van de NCCN, NSCLC clinical practice guidelines werd tagrisso (AZD9291) aanbevolen als een tweedelijnsbehandeling voor patiënten met de T790M-mutatie of die eerste generatie TKI kregen die leidde tot geneesmiddelresistentie.15 4. Met-remming: MET-versterking wordt gedetecteerd in ongeveer 5% van de tumoren met verworven resistentie tegen TKIs21. Daarom kunnen therapieën gericht op voldaan Een effectieve strategie in MET-amplified tumoren zijn43. 5. Immuuntherapie: volgens een multicenter klinische studie kan de eerste generatie TKI + PD-1 monoklonaal antilichaam 19% RR en PFS bereiken in 24 weken44.

in het algemeen is het mogelijk om tumor-afgeleide T790M mutaties in het EGFR-gen te detecteren met behulp van cfDNA van patiënten met NSCLC die Superarmen gebruiken. Het aantal T790M-mutaties bij NSCLC-patiënten in Xuanwei City vertoonde geen significant verschil met de andere Aziatische populaties. Onze studies toonden aan dat NSCLC-patiënten met hersenmetastase, voorgeschiedenis van eerste generatie TKI ’s en duur van TKI’ s > 6 maanden, een relatie hadden met een hoger T790M-mutatiepercentage. Bovendien werden de superwapens gebruikt om van T790M-veranderingstarief te ontdekken, dat één van de belangrijkste recente doorbraken in NSCLC oncologie is. Gezien de beperking van onze studie, zou verder onderzoek een grote steekproefgrootte van meerdere centra in de provincie Yunnan moeten onderzoeken om het representatiever te maken voor de totale bevolking. Door analyse van de significantie en de klinische productiviteit van de detectietechnologie voor de T790M-mutatie, vonden we dat de detectietechnologie voor de T790M-mutatie patiënten kon helpen om een behandelingsstrategie te bepalen, hen kon helpen behandelingskosten te besparen en een betere prognose te verkrijgen, en misschien wel het belangrijkste, zinvolle begeleiding kon bieden voor de behandeling van geneesmiddelenresistentie bij patiënten met de T790M-genmutatie.

Geef een antwoord

Het e-mailadres wordt niet gepubliceerd.